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    如何讓干細(xì)胞不分化 新型培養(yǎng)基來幫忙

    發(fā)布時間: 2010/5/4  點擊次數(shù): 1747次
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    以色列耶路撒冷哈達薩大學(xué)的研究人員近日開發(fā)出一種新的干細(xì)胞培養(yǎng)基,能讓干細(xì)胞在更長時間內(nèi)不分化。這項研究是由哈達薩人類胚胎干細(xì)胞研究中心的主管Benjamin Reubinoff領(lǐng)導(dǎo)的,發(fā)表在近期的《Nature Biotechnology》上。作者們相信這項技術(shù)將對臨床應(yīng)用所需的大量hESC特別有用。

    為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細(xì)胞(也就是一層小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng)。但是在這些基質(zhì)上培養(yǎng)干細(xì)胞是相當(dāng)昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長時間內(nèi)保持未分化狀態(tài),盡管所有必需的生長因子都存在。

     

    Reubinoff的研究團隊正在研究hESC簇分化成神經(jīng)細(xì)胞,他們一直在使用Invitrogen的Neurobasal培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基能夠在無滋養(yǎng)層的條件下長時間維持神經(jīng)細(xì)胞的生長和正常表型。在研究過程中,研究人員注意到并非所有細(xì)胞都分化了。他們懷疑是培養(yǎng)基的選擇導(dǎo)致了這種現(xiàn)象,于是他們開始集中精力研究培養(yǎng)基如何促進干細(xì)胞生長并抑制分化。

    為了驗證他們的理論,研究小組定制了培養(yǎng)基。他們在Neurobasal培養(yǎng)基中加入了血清替代物,還加入了干細(xì)胞生長所需的蛋白,包括細(xì)胞外基質(zhì)組分、神經(jīng)營養(yǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長因子2和活化素A。研究人員在常規(guī)的無血清培養(yǎng)基和定制培養(yǎng)基中培養(yǎng)了hESC。三個星期之后,定制培養(yǎng)基中存在更多的未分化hESC細(xì)胞。

    使用這種新的培養(yǎng)基,研究小組檢驗了三種不同的hESC系。他們利用熒光激活細(xì)胞分選(FACS)在7周和20周后分析了培養(yǎng)物,發(fā)現(xiàn)90%的細(xì)胞仍維持多能性。這項突破為在計算機化的自動系統(tǒng)中大規(guī)模擴增胚胎干細(xì)胞創(chuàng)造了可能性。此外,通過改變培養(yǎng)條件,還可能進一步指導(dǎo)干細(xì)胞長成特定的細(xì)胞類型,用于研究或病人的移植。

    然而,研究小組也承認(rèn),他們的方法并不。在細(xì)胞傳代過程中,他們丟失的細(xì)胞數(shù)是滋養(yǎng)層培養(yǎng)方法的近3倍。他們還將繼續(xù)完善這種技術(shù),以確保培養(yǎng)產(chǎn)量盡可能地高。

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